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口蹄疫病毒檢測試劑盒

 
品牌: 大有泰萊
規格: 48頭份
保存期及貯藏條件: 本產品-20℃避光可保存12個月
單價: 2000.00元/盒
起訂: 1 盒
供貨總量: 500 盒
發貨期限: 自買家付款之日起 3 天內發貨
所在地: 北京
有效期至: 長期有效
最后更新: 2021-03-31 19:33
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公司基本資料信息
詳細說明
       規格:48頭份

介紹:口蹄疫(Foot and Mouth Disease ,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種高度接觸性傳染病,對易感的偶蹄動物具有嚴重的潛在經濟危害。其特征是在口、舌、唇、鼻、蹄、乳房發生水泡,并潰爛形成爛斑。世界衛生組織(OIE)將其列為必須通報疾病。我國2008年修訂的《一、二、三類動物疫病病種明錄》將其列為一類動物疫病。

用途:該試劑盒用于對FMDV進行檢測,有助于對FMDV的實驗室診斷、監測和流行病調查。

原理:本試劑盒采用一步法實時熒光反轉錄聚合酶鏈式反應(One-Step Real Time RT-PCR) ,結合Taqman技術,對特異核酸進行定性或定量檢測。

試劑盒的組成

試劑名稱

數量

FMD反應液

550μL×1管

FMD酶

40μL×1管

FMD引物探針

120μL×1管

無核酸水

1000μL×1管

FMD陰性對照

50μL×1管

FMD陽性對照

50μL×1管

保存期及貯藏條件:本產品-20℃避光可保存12個月。

樣品收集,操作和儲存

1. 最好選擇發病早期,無菌采樣并立即送往實驗室進行病毒檢測。

2. 樣品短期可在4℃冷藏保存,較長時間保存應在--20℃或者-70℃,并且避免反復凍融。

檢測步驟

1.核酸提取

樣品進行適當處理后,可采用本公司的核酸提取試劑盒,該試劑盒可用于對樣本中病毒RNA的提取,請按照提取試劑盒說明書進行操作。也可選擇其他合適的商品化產品。

2.擴增試劑的準備

將樣品數+1份陰性對照+1份陽性對照設為N,計算試劑所需量,反應體系配制見下表

試劑名稱

N份用量(20μL 體系

FMD反應液

10μL×(N+1)

FMD酶

0.5μL×(N+1)

FMD引物探針

1.8μL×(N+1)

無核酸水

5.7μL×(N+1)

將各試劑按照表中用量加入無菌離心管中,充分混勻,短暫離心后在PCR反應管中分別加入18μL混合液。

 

 

3.加樣

將制備好的樣本,陰性對照,陽性對照各取2μL分別加入對應反應管中,加完后蓋緊PCR反應管蓋,置于PCR儀上。

4.熒光PCR擴增與信號收集

循環數

溫度(

時間

數據收集位點

1

45

15min

-

1

95

2min

-

40

95

15s

-

 

60

1min

數據收集

 

 

注:報告基團選FAM,淬滅基團選NONE。

 

結果成立原則

陽性對照:CT值<30并有明顯的擴增曲線。

陰性對照:無CT值或者CT值>37,線性為直線或者輕微斜線,無明顯擴增曲線。

以上要求需同時滿足,否則本次實驗無效,需要重新進行。

 

結果判定

CT值

樣本檢測結果

<30并有明顯的擴增曲線

陽性,樣本中檢測出FMDV。

30-37

可疑,需重復檢測。若第二次檢測CT值仍為30-37并有明顯擴增曲線則判定為陽性,否則為陰性。

>37并無擴增曲線

陰性,樣本中未檢測出FMDV。

 

注意事項

1.反應體系應在特定配液區或者超凈工作臺中配制,整個實驗過程嚴格控制污染。

2.PCR整個試驗分配液區、模板提取區、擴增區。流程順序為配液區→模板提取區→擴增區。嚴禁器材和試劑倒流。

3.使用不含熒光物質的一次性手套,一次性離心管。

4.反復凍融試劑將減低檢測靈敏度,本試劑盒應在5次內用完.

5.-20℃保存的各試劑管使用前應在室溫下完全融化,液體融化后需徹底混勻,2000 rpm離心15 s ,使用后立即放回-20 ℃。

6.在RNA提取過程中,避免RNA酶污染,盡量縮短操作時間。

7.注意防止試劑盒組分受污染。不要使用超過有效期限的試劑,試劑盒之間的成分不要混用。

8.PCR反應管避免氣泡存在,管蓋需蓋緊。

9.不同批次的試劑盒勿混用。


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